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上海交通大学药学院OVA诱导哮喘动物模型介绍

发布时间:2022-08-25      点击次数:63

哮喘的发生发展与遗传、免疫、环境和药物作用等有关,其诱发因素包括过敏原、  病毒感染、刺激物、运动等。 其病理特点为Th2淋巴细胞免疫反应强, IL-4、 IL-5、 IL-13增强,导致嗜酸性粒细胞浸润增多、粘液分泌增多、支气管高反应性(BHR)、 免疫球蛋白E (IgE)合成和组织重塑。 临床表现为气喘、胸闷、咳嗽等症状,多发生 在夜间或凌晨,因此建立可靠的哮喘动物模型对于探究哮喘的发病机制,发现药物 作用靶点具有重要意义。

目前哮喘模型选取的动物主要用BALB/c 小鼠、C57小鼠、  SD 大鼠、  Wistar 大鼠和 豚鼠等。用于诱导哮喘的诱导剂包括卵清蛋白( OVA),尘螨、豚草、曲霉属真菌   混合物( DRA),屋尘螨( HDM )等,其中OVA*为应用。常用的造模方式包括气 管给药、鼻腔滴入、雾化吸入等。

检测指标

肺泡灌洗液

1. 各组总细胞数的变化

2. 各组总蛋白浓度的变化

3.  ELISA检测哮喘相关细胞因子:IL-4,IL-5,IL-13等变化

OVA造模组,肺泡灌洗液中蛋白总量以及细胞的总数明显增加,药物作用 后,蛋白总量和细胞总数均有所减少,说明药物作用之后哮喘得到缓解。

流式检测各组嗜酸性粒细胞、巨噬细胞比例的变化

OVA未造模组肺泡灌洗液主要是巨噬细胞, OVA造模之后,嗜酸性粒细胞显 著增加,巨噬细胞减少。在OVA造模组,药物作用之后,嗜酸性粒细胞未明 显增加,巨噬细胞未明显减少。

血清

1. 各组总Ig E的变化

2. 各组OVA特异性Ig E的变化

肺组织

1. Western blot  检测各组蛋白的变化,如Muc5ac, Fizz, Arg 等

2. q-PCR 检测各组mRNA的变化,如IL-4,IL-5, IL- 13, IL-25, TSLP, GM-CSF等。

3. H&E 染色检测各组炎性细胞浸润的变化

4. PAS 染色检测各组糖原产生的变化

相关参考文献:

AMFR drives allergic asthma development by promoting alveolar macrophage–derived GM-CSF production.


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