一般是将孕雌鼠麻醉然后解剖，胎儿收集到HBSS-1中然后快速断头。剥离脑膜和白质后，大脑皮质收集入HBSS-2液中机械磨碎。皮质碎片移到有0.025%胰酶的HBSS-2液中37°C消化15分钟。胰酶消化后，细胞用含有10%胎牛血清的HBSS-2液冲洗两次，用神经基础培养液重悬细胞（培养液添加了0.5mM左旋-谷氨酰胺，25μM左旋-谷氨酸，2%B27和0.12mg/mL庆大霉素）。以1×105cell/cm2接种到事先用多聚赖氨酸包被的培养皿上，放到37°C，5%CO2湿温培养箱里进行培养。每3天用吸管换液，一次换0.5mL。体外培养8天细胞就能用于实验。
1、取胚胎期第18天（E18）的孕鼠（小鼠的cellculture可取P0-P1的新生鼠，冰上麻醉），用异氟烷混合气体麻醉（注意：最好不要腹腔注射水合氯醛进行麻醉，因为腹腔注射对胎鼠影响较大）；
2、在冰上迅速破腹取出胎鼠；
3、将胎鼠的头剪下放在冰的dissectionmedium里；
4、剥去皮肤组织和颅骨，将大脑连接小脑一起取出放在另一个装有冰的dissectionmedium的dish中；
5、将dish放在冰上，将大脑分割成两半，分割时在与小脑连接的腹侧基部断开，这样便于暴露海马；
6、拨去脑膜，用小剪刀将海马剪出。由于皮层细胞较多，此时可将接近小脑的那些皮层组织夹去（注意：不要用镊子挤捏脑组织，这样会造成大面积细胞死亡，不利于后续的培养）；
7、在dish中将组织用小剪刀减碎；
8、吸取含有组织碎块的dissectionmedium至5ul的epp管中；
9、静置一段时间，待组织碎块沉降至底部后吸取上清（不需要吸的很干净）；
10、在另一个5ml的epp管中按照trysin：DNA酶：digestionsolution=1：1：3的体积比混合，用过滤器过滤后加入组织块中；
11、在37度消化7-8分钟，最长不要超过15分钟（消化时间根据酶的浓度确定），每2分钟混匀一下；
12、此时可以在5ml的epp管中准备trysininhibitor(TI)：dissectionmedium=1：4的混合液（也可以用5%FBS+Neurobasal+B27代替），在预先coating的dish中加入一定量的5%FBS+Neurobasal+B27混合液；
13、将消化的组织块从37度中取出、离心，也可自然沉降，吸取上面多余的液体后，加入第12步的混合液中止消化，37度静置2-3分钟；
14、以下步骤要求在冰上完成。静置，待组织块沉到底或者离心后，吸走上清液，然后加入DNA酶（可用dissectionmedium稀释），吹打；
15、离心5-6分钟，吸走上清；
16、加入2-3ml的dissectionmedium后，用移液器或者吸管将碎组织块吹散；
17、10倍稀释后计数（10ul悬浮液+90ul台盼蓝）；
18、按照要求浓度铺板，然后充分混匀；
注意：一般一只小鼠的脑子可以取得2x10^7-3x10^7个神经元，体外培养3-9天的神经元均可以被慢病毒感染。
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