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来自结直肠癌的病人类器官原代培养

更新时间:2024-04-19      点击次数:191
一、操作步骤

1.组织 4℃ 条件下从医院取回。
2.消毒取样的 15ml 管,取出组织,放到 10ml 大皿中。
3.用含 4 抗的 PBS 溶液浸泡,清洗组织。
4.再用组织缓冲液浸泡、清洗三遍。
5.将组织剪成 1mm3 大小的组织块,转移到 15ml 管中消化。
6.在 37℃ 水浴锅中,消化 15min。
7.取少量液体在显微镜下观察,看到较多的单细胞和较少的细胞簇后,终止消化。
8.用 100μm 筛过滤,然后 300g4℃ 离心 5min,移去上清。
9.重悬沉淀,转移到 2ml 离心管中,300g4℃ 离心 5min,移去上清。
10.估算沉淀的细胞量,以 1:25 的比例添加基质胶,重悬。
11.24 孔板铺板,冰上操作,每孔点胶 25ul。
12.铺板后,放到 37℃ 细胞培养箱中 15min 成胶。

13.然后每孔添加 600ul 结直肠癌类器官培养基,放到 37℃ 细胞培养箱中。


二、结果展示

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