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原代神经干细胞
1. 牺牲胎龄14-16天的SD大鼠,刮除腹部手术区域的毛发,75%乙醇全身浸泡消毒。
2. 解剖孕鼠,取出子宫并冲洗。
3. 取出胚胎,置于含有冰冷的HBSS液平皿中。
4. 手shu显wei镜下剥离出大脑半球,小心地剥去脑膜和血管。
5. 剥去脑膜和血管的大脑皮质,用冰冷的HBSS液清洗三次。
6. 将大脑皮质剪成1mm3的小块,用1ml枪头轻轻吹打后,使之成为细胞悬液,并通过70um的筛网过滤。
7. 将收集到的细胞悬液离心后,用神经干细胞基础培养液重悬,然后离心,弃掉上清液。
8. 经计数和活力观察,将细胞密度调至1×106/ml,以1.5×105/ml的细胞密度种入T25培养瓶中,同时加入FGF-2和EGF于5%CO2、37℃环境中培养,直到神经干细胞分裂、增殖形成较大的神经细胞球后再作传代处理。
9. 细胞传代,将神经细胞球悬液移至离心管,经低速离心后,吸弃上清液,加入神经干细胞完quan培养液,用200ul枪头吹打,使之成为单个细胞悬液,定量加入神经干细胞完quan培养液后,进行细胞计数和活力观察。
10. 传代后的细胞既可用来诱导分化,也可以继续种瓶培养,还可以冷冻保存以备后用。
11. 神经干细胞的分化和鉴定。
原代神经干细胞
伊莱博生物科技(上海)有限公司,公司总部位于上海长江软件园。2022年1月与上海交通大学药学院成立联合研究中心,主要以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务创新,建立了包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学以及动物实验等学科的研究服务体系,为医学领域的发展做出了重要贡献。
伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有精良的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自中国科学院大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。
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