Olink蛋白组

一、核心原理：PEA 技术（一句话讲透）

1. 抗体对 + DNA 标签：每个目标蛋白对应一对抗体，分别偶联互补的单链 DNA（各带蛋白特异条形码）。

2. 双识别 + 邻位杂交：只有两个抗体同时结合同一蛋白，两条 DNA 才会靠近、杂交成双链。

3. 延伸 + 扩增 + 定量：DNA 聚合酶延伸→PCR 扩增→qPCR/NGS 读数；信号强度 = 蛋白浓度。

4. 关键优势：非特异性结合不会让 DNA 靠近，几乎无背景，特异性可达 99.7%。

二、Olink蛋白组技术特点

· 超微量：1–6 μL血清 / 血浆即可（比传统 ELISA 少 100 倍）。

· 超高灵敏：检测下限 fg/mL 级，能抓到极低丰度的细胞因子、信号蛋白

· 超宽动态：10 个数量级，同时覆盖高丰度（白蛋白）与低丰度（炎症因子）

· 高通量：一次可测 96–384 样本；蛋白数：Target（48/96）、Explore（384）、Reveal（~1000）。

· 高重现：CV<10%（板内）、<20%（板间），适合大队列（上万例）。

· 样本类型：血清、血浆、脑脊液、尿液、细胞上清、组织裂解液。

三、实验流程（5 步出结果）

1. 样本准备：血清 / 血浆，1 μL 足够。

2. PEA 反应：加抗体对→孵育结合→DNA 杂交延伸。

3. PCR 扩增：生成带条形码的扩增子。

4. NGS/qPCR 检测：测序或荧光定量，得到每个蛋白的读数。

5. 数据分析：标准化→差异蛋白→通路富集→ biomarker 筛选。

四、Olink蛋白组应用场景

1. 疾病 Biomarker 筛选：肿瘤早筛、自身免疫病、神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）、心血管病；AUC 可达 0.9+。

2. 大队列流行病学：UK Biobank、中国慢性病队列，上万样本的蛋白组扫描

3. 药物研发：靶点验证、药效监测、耐药机制、pQTL 研究（蛋白数量性状位点）

4. 多组学整合：Olink（蛋白）+ 基因组 + 转录组 + 代谢组，构建疾病分子网络。

5. 免疫与炎症研究：细胞因子、趋化因子、免疫检查点蛋白的原位 / 循环水平分析