浅看免疫组化技术服务的切片制备

　　免疫组化技术服务是伊莱博生物实验组成之一，作为常见实验，日常实验之一。该实验由从事动物实验专业，经验丰富的人员进行操作。免疫组化，是应用免疫学基本原理—抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究方法。

　　免疫组化技术服务的切片制备：

　　1、洗载玻片：将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了将载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右)，再将载玻片浸泡于酒精之中，然后放到架子上，置于37°C温箱中，将多聚赖氨酸涂布于玻片的表面，由于Lys带正电，而大多数的组织带负电荷，从而产生吸附作用。

　　2、包埋组织：先在铁模具中加入一些液态石蜡，先稍微冷却，然后再将待包埋的组织置于石蜡之中，并排列整齐，再将塑料模具盒盖上，后加入少许液体石蜡，进行冷冻，使石蜡变成固态。

　　3、切片：将包埋好的组织从模具上取下来，并置于石蜡切片机上，切片机通过调节上下左右来使组织和切割方向一致，然后调节切片的厚度，一般为5mm，如果比较难切，则可以适当调整厚度。用小镊子将包含有完整组织的载玻片置于40°C温水中。

　　4、捞组织：当组织载玻片置于40°C温水中之前，要先将水浴中的气泡赶走，以免气泡受热上浮而贴到组织上，组织受热展开，好是组织不起皱纹，用载玻片捞组织时，一般取载玻片的下1/3或者下1/2一般每种组织捞5-6张，其中2-3张是备用的，每张载玻片上通常捞两份组织，做对照使用，这样形成的误差就比较小了，而且捞载玻片的时候好方向一致，以便观察，再将捞出来的载玻片置于架子上，放入37°C温箱中烘干。