动物皮下成瘤实验

动物皮下成瘤实验

动物类型：裸鼠

造模试剂：肿瘤细胞或肿瘤组织块

造模方法：一般是皮下注射成瘤（腋下或背部皮下 ）

接种细胞密度1*10^6~5*10^7cell/ml，接种0.1ml~0.2ml，就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或PBS中，放于冰盒中携至动物房，直接注射即可。

死亡率：10%，成功率：90%左右

动物皮下成瘤实验技巧

1、细胞状态是成瘤实验的关键，所以细胞生长状态一定要好，取处于对数生*的细胞，细胞达80-90%左右密度为宜;收集细胞前一天晚上更换新鲜培养基。
2、胰酶消化细胞后用预冷的PBS洗两遍，目的为去除细胞中的血清。
3、用PBS或者无血清培养基吹打细胞沉淀至合适的浓度，一般皮下瘤接种的细胞量为1-5×10^6个细胞/支，接种体积为0.1ml，因此细胞悬液的浓度为1-5×10^7个细胞/ml。
4、细胞消化后应尽快接种到裸鼠皮下，一般尽量在半小时内完成，途中将细胞悬液放在冰上降低细胞的代谢。
5、选择的裸鼠一般在5-8周龄，体重18-20g左右，种植部位选择血供丰富区域，如腋窝中后部、腹股沟中上部。
6、接种前用枪将细胞悬液充分的吹散，防止细胞成团而降低细胞成活率。
7、接种时，针头在皮下进针深一点，约1cm深，减少注射后细胞悬液从针眼溢出。
8、如何抓牢裸鼠?左手拇指和食指捏紧裸鼠颈背部皮肤，小拇指夹住裸鼠尾巴。