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细胞石蜡包埋技术服务

简要描述：新鲜细胞经过固定聚集脱水透明浸蜡后用特定的包埋模具将前期处理的细胞团块与融化的石蜡一起包埋成组织蜡块的过程称为细胞取材包埋。

更新时间：2026-03-20
厂商性质：代理商
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一、核心用途

贴壁 / 悬浮细胞的形态学观察
细胞蛋白表达定位 / 定量（免疫组化）
细胞凋亡 / 增殖检测
细胞纤维化 / 脂质沉积特殊染色
细胞基因表达（原位杂交）

二、标准完整流程（悬浮 / 贴壁通用）

1. 细胞收集（关键：形成致密细胞团）

悬浮细胞：离心（1000–1500 rpm，5 min），弃上清，PBS 重悬，再离心，重复 2 次
贴壁细胞：yi酶消化（0.25% yi酶 - EDTA），终止消化，离心收集，PBS 洗 2 次
最终：细胞沉淀≥5×10⁶个（太少易丢失、切片无细胞）

2. 固定（防细胞结构破坏）

细胞沉淀加4% 多聚甲醛（体积≥沉淀 10 倍），室温固定 30–60 min
离心弃固定液，PBS 洗 2 次（每次 5 min）

3. 细胞团成型（避免松散）

固定后细胞加少量 PBS 重悬，转移至1.5 mL EP 管
再次离心（1500 rpm，5 min），弃上清，保留致密细胞沉淀（约 1–2 mm³）
可选：加1% 琼脂糖（45℃预热）包裹细胞团，冷却凝固，便于后续操作

4. 脱水（梯度乙醇，防细胞收缩）

70% 乙醇 → 30 min
80% 乙醇 → 30 min
90% 乙醇 → 30 min
95% 乙醇 → 20 min × 2
100% 乙醇 → 20 min × 2

5. 透明（置换乙醇，利于浸蜡）

二甲苯 Ⅰ → 15 min
二甲苯 Ⅱ → 15 min

6. 浸蜡（石蜡浸透细胞团）

二甲苯：石蜡（1:1）混合液（56–58℃）→ 30 min
石蜡 Ⅰ（56–58℃）→ 60 min
石蜡 Ⅱ（56–58℃）→ 60 min

7. 包埋（制成蜡块）

包埋模具预热，倒入熔蜡（底层 1–2 mm），稍冷却
用镊子将细胞团切面朝下置于模具中央
补满熔蜡，冷却台凝固 15–30 min，脱模、修整蜡块

8. 切片与后续

轮转切片机切4 μm连续切片
45℃水浴展片，防脱载玻片捞片，60℃烤片 2–4 h
后续：脱蜡→染色（HE/Masson/IHC）→封片

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一、核心用途

二、标准完整流程（悬浮 / 贴壁通用）

1. 细胞收集（关键：形成致密细胞团）

2. 固定（防细胞结构破坏）

3. 细胞团成型（避免松散）

4. 脱水（梯度乙醇，防细胞收缩）

5. 透明（置换乙醇，利于浸蜡）

6. 浸蜡（石蜡浸透细胞团）

7. 包埋（制成蜡块）

8. 切片与后续

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