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冰冻切片制片实验步骤:
1、组织固定:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用刀将目的部位组织修平整。
2、脱水:将修切好的组织放于15%的蔗糖溶液内4°冰箱脱水沉底后转入30%的蔗糖溶液内4°冰箱脱水沉底。
3、OCT包埋:将脱好水的组织取出用滤纸将表面水稍吸干后切面朝上放干包埋台上,组织周围滴FOCT包埋剂,将包坤台放在冰冻切片机的速冻台上速冻包埋,OCT变白变硬后即可进行切片。
4.切片:将包样台固定干切片机上,先粗切将组织面修切平整后即可开始切片,切片厚*810um,将十净的载玻片平放干切出的组织片上方即可将组织贴干载玻片上。-20°保存备用。
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