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光老化模型构建模式动物
品系SPF级ICR小鼠,健康,雄性,6~8W。
来源UVA,UVB紫外导致皮肤老化
实验分组实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期4-6 weeks
光老化模型构建造模方式
雄性ICR小鼠,年龄约6周。小鼠在正常温度下(23±2℃)湿度(55%±10%)和光照(12小时光照/ 12小时黑暗,无紫外线照射)喂养。喂养一周,等小鼠适应了环境,用8%硫化钠在小鼠的背部剃出超过2厘米x3厘米的脱毛区。
紫外照射方法:2根UVB灯管和4根UVA灯管(40W,北京电光源研究所)并列穿插安放至自制福照箱中作为紫外福照光源。利用紫外照度仪(UV-B紫外辐照计、UV-A紫外辐照计 北京师范大学光电仪器厂 )测定UVA和UVB的辐射强度。造模前,UV灯管预热10 min,待光源稳定后将实验鼠放入自制的鼠笼内(使小鼠间不能相互攀爬、站立),并放入箱照箱内,鼠笼与UV灯管相距30 cm,根据预试所得最小红斑剂量(MED)及光源强度调节福照时间,照射期间用排气扇降低箱体温度。第1周按1个MED的剂量进行照射,每周照射3次,往后每周照射剂量比前周递增1个MED,直至第4周4个MED为止,之后保持4个MED直至第8周实验结束。模型组小鼠背部皮肤出现明显增厚、皱纹粗深、松弛等光老化皮肤表征,说明小鼠皮肤光老化造模成功。
MED测定方法:对预实验小鼠分别采用30mJ/cm2、60mJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2、180mJ/cm2的紫外福照剂量对其背部皮肤进行辐照,照射后24h观察小鼠背部皮肤出现肉眼可见红斑所需剂量为最小红斑剂量(MED)。
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