动物组织石蜡包埋和切片实验技术服务

简要描述：石蜡包埋能够保护样本、固定组织结构、促进切片和染色等

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组织石蜡包埋和切片：

1、切取组织，浸泡在4％用pH7.4 BS配成的甲醛固定剂中，室温24小时。

附：4％甲醛固定剂（5ml）：4.5ml 1×PBS(pH7.4)+0.5ml甲醛

2、倒掉甲醛固定剂，加pH7.4 BS,每隔8小时更换一次，4℃保存，换液共3天。

3、打开烘箱，调温至62℃，融石蜡。

4、酒精梯度脱水（30％、50％、70％、80％、90％、95%、100％×2），隔30分钟更换一次。

5、50％酒精＋50％二甲苯30分钟（过渡步骤）。

6、100％二甲苯，时刻观察组织块至透明。

7、放入烘箱中已经预融的50％石蜡＋50％二甲苯中，30分钟。

8、100％石蜡两遍，每次2小时。(若石蜡浸润不够，仍有二甲苯，则包埋后的石蜡块较脆，易分层、断裂。)

9、100％石蜡纸盒内凝固（先用蜡打底，再放入组织块，浇上蜡包埋，放入4℃冰箱或水中冷凝，标明组织块放入方向），4℃存放备用。

10、修块。

11、融化石蜡抹于块底，贴在木块上，压实。

12、切片（5－10μm）,将切片平展于平板上，光面朝上。

13、将光面朝下，将石蜡薄切片放于水面上（水温40℃），使其伸展。（时间勿太长）。

14、将石蜡薄片贴在预先处理好的玻片上。

15、40℃烘烤过夜。

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