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流式JC-1检测

简要描述:线粒体膜电位是指线粒体内膜两侧的电位差,它是细胞能量代谢的关键指标之一。JC1是一种常用的线粒体膜电位检测染料,其原理是基于JC1 在不同浓度下呈现出不同的荧光颜色。
JC1 有单体和多聚体两种存在状态。在低浓度时,JC1 以单体存在,此时可以检测到绿色荧光。在流式检测中,通常使用 FL-1通道(与 FITC通道)进行检测。当 JC1 浓度较高时,它会以多聚体形式存在,此时可以检测到红色荧光。在流

  • 更新时间:2024-03-14
  • 厂商性质:代理商
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详细介绍

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JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法):

1. 于6-,12或24-孔板上进行细胞铺板,密度为5×105 cells/mL。37℃,5% CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/mL,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。

2. 取0.5 mL细胞悬液至无菌的离心管内;

3. 室温条件400 x g离心5 min;吸掉上清。

4. 用0.5 mL JC-1工作液重悬细胞,于37℃,5%CO2培养箱孵育15-30 min;注意:一般情况,15 min足以进行充分的染色。

5. 室温条件400 x g离心5 min;吸掉上清;

6. 用2 mL细胞培养液或者缓冲液重悬细胞,之后室温条件400 x g离心5 min;吸掉上清;

7. 重复步骤6);

8. 用0.5 mL新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞,即可进行后续的流式分析。注意:请马上进行流式定量分析,此细节很重要。

数据分析:含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测;含有绿色JC-1单体的凋亡或不健康细胞用FL1(FITC)通道检测。


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