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细胞划痕实验

简要描述:人为地在融合的单层细胞上制造一个空白区域,边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕"愈合,又名伤口愈合实验(Wound-Healing Assay)
细胞划痕实验是目前测定细胞迁移运动与修复能力的zcy也是zjd的方法,科研中常常用来观察某外源因素对细胞迁移影响。

  • 更新时间:2024-03-22
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:117

详细介绍

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实验步骤

 

标记六孔板

marker笔在六孔板底部画平行线,平行线之间的距离0.5cm,为了保证后续拍照位置是相同的;

 

铺板

 

细胞重悬铺板,密度控制在第二天长满,若过夜后细胞wq长满,也可以适当延长培养时间,但如果细胞密度已经很大,尽量重新铺板,因为可能过一天后细胞太满,会导致细胞状态逐渐变差,后续细胞可能不迁移而是凋亡;

 

制造划痕

 

第二天用直尺比着使用10ul枪头制造划痕,划痕方向与标志线垂直,最好保持力度一致,尽量一次性划完,然后PBS冲洗3次,洗去漂浮的细胞

 

为了减少细胞增殖所引起的假阳性结果,降低细胞增殖对实验结果的影响,将wq培养基换成无血清培养基和低血清培养基(FBS2%继续培养细胞);

 

 

 

拍照

 

拍照前最好用PBS冲洗3次,一般认为24h为细胞的一个周期,所以检测时间最好不要超过一个周期的时间,按照6孔板背后画线的垂直方向划痕


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