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肺纤维化动物模型构建服务

简要描述:肺纤维化动物模型构建服务是异常修复造成不可逆损伤的一类疾病,以炎症和细胞外基质沉积为特征,呈进展性和致死性的弥漫性肺间质疾病,其中,特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)发病率最高。

  • 更新时间:2024-06-17
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详细介绍

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一、肺纤维化背景简介

肺纤维化(pulmonary fibrosisPF)是肺组织异常修复造成不可逆损伤的一类疾病,以炎症和细胞外基质沉积为特征,呈进展性和致死性的弥漫性肺间质疾病,其中,特发性肺间质肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)发病率最高。

二、肺纤维化动物模型简介

构建一个理想的肺纤维化模型,不仅有助于进一步筛选肺纤维化生物标志物,同时也为深入研究肺纤维化发病机制及动物临床治疗肺纤维化和研发新药提供科学基础。

三、肺纤维化动物模型构建方法

1. 实验动物

C57小鼠   6周龄

2. 实验材料

C57小鼠,blms,注射器

3. blms诱导模型制备流程

1小鼠按照麻醉剂剂量麻醉后固定,呈仰卧位姿势,气管居中,暴露颈部,剪毛备皮,无水乙醇消毒后沿颈部中线开口(开口大小:0.5-1cm左右)缓慢钝性分离至气管,此时需要轻柔操作,减少因手术操作造成的气管损伤。

2使用注射器(1ml或者微量注射器,胰岛素针不失为好的选择),针头几乎平行于气管平面,经气管软骨环间隙朝向心端插入气管内,回抽无阻力,则注入少量的blms溶液(不超过0.2 ml/只,肺内大量积液会导致动物的死亡)。

3注射完毕后,缝合伤口,后将动物直立1-3 min,适度左右转动,并轻轻按摩小鼠胸部,保证blms在肺内均匀分布,动物清醒后常规饲养。(3天左右即可出现损伤,体重降低等症状)28d后收集样本。

4.模型鉴定

4.1 HE染色观察肺组织肺泡炎程度

肺组织肺泡炎评分:无肺泡炎计1 分,轻、中、重度肺泡炎分别计2、3、4 分。轻度肺泡炎主要表现为单核细胞浸润,肺泡间隔增宽但结构正常,浸润局限于近胸膜部,受累面积小于全肺的20 %;中度肺泡炎受累面积占全肺20 % ~ 50 %;重度肺泡炎受累面积占全肺的50 % 以上,偶见肺泡腔内有单核细胞及出血造成实变

4.2 Masson染色观察肺组织肺纤维化程度

肺纤维化程度评分:无纤维化计1 分,轻、中、重度肺纤维分别计2、3、4 分。轻度纤维化主要累及胸膜及胸膜下肺间质,肺泡结构紊乱,受累面积小于20 %;中度纤维化受累面积占全肺的20 %~50 %;重度纤维化受累面积占全肺的50 % 以上,肺实质紊乱,并有融合,可见大小不等的囊气腔。

四、小结

PE动物模型中,BLM造模可行性好,研究性强,能够重视一般PE,其用于IPE发病机制的研究和有效治疗药物的研发具有很大的实用价值。但是BPF动物模型与临床IPE相比仍存有一定差异,在实验研究应用方面也有一定局限性,因此需加强对BLM作用机制及IPE的研究,进一步明确其相关性。

五、参考文献

[1] 张成华 ,朱庆均 一,田景振 1.山东中医药大学药学院,济南 250355;2.山东中医药大学中医学院,济南 250355;3.山东省高校中医药抗病毒协同创新中心,济南 250355

[2]Villarreal AM,Yu H,Printz MP.Bradykinin—induced re— duction in collagen gene expression involve prostacyclin[J]. Hypertension,1998,32(1):81—84.

[3]蔡后荣 2011年特发性肺纤维化诊断和治疗循证新指 南解读 .中国呼吸与危重监护杂志,2011,10(4):

[4] Lutz W ,Eva W,Alexander P,et a1.Mode ofaction of nintedanib in the treatment of idiopathic pulmonary fibro— sis[J].EurRespir J.2015,45(5):1434—1445.

[5]Hinz B,Phan SH,Thannickal VJ,et a1.Recent develop— ments in myof

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