人肝癌原位小鼠动物模型
人肝癌原位小鼠动物模型
1. 细胞悬液注射法
这种方法通过将人肝癌细胞悬液直接注射到小鼠肝脏中,构建原位肝癌模型。
操作步骤:
细胞准备:选择稳定表达萤光素酶报告基因(LUC)的人肝细胞癌细胞株(如Hep3B或HepG2),制备不同浓度的细胞悬液。
动物选择:使用5周龄雌性BALB/c裸小鼠。
注射方法:麻醉小鼠后,开腹暴露肝脏,选择肝叶进行细胞悬液注射。推荐注射浓度为:
术后处理:定期监测小鼠体重和肿瘤生长情况,使用小动物活体成像系统观察肿瘤生长。
优点:
操作相对简单,成瘤率高。
可通过活体成像系统实时监测肿瘤生长。
2. 组织块移植法
这种方法通过将人肝癌组织块移植到小鼠肝脏中,构建原位肝癌模型。
操作步骤:
组织准备:从皮下接种的腹水型肝癌H22细胞中获取1 mm³的肿瘤组织块。
动物选择:使用SPF级雄性KM小鼠。
移植方法:麻醉小鼠后,开腹暴露肝脏,将肿瘤组织块植入肝叶内,缝合伤口。
术后处理:术后每2天观察小鼠状态,术后第25天评估成瘤率。
优点:
更接近临床肿瘤的组织结构。
适合研究肿瘤微环境和转移。