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弗氏佐剂免疫性前列腺炎模型动物构建
弗氏佐剂免疫性前列腺炎模型动物构建
取雄性大鼠前列腺组织,经匀浆、离心后提取前列腺蛋白提纯液,用PBS缓冲液稀释至 5-15 mg/ml 浓度。
需注意无菌操作,避免外源性污染。
弗氏佐剂(CFA)配制:将石蜡油与羊毛脂按2:1混合,加入灭活结核分枝gan菌(终浓度2-20 mg/ml)。
乳化方法:将抗原与CFA按 1:1体积比 混合,通过注射器反复推注或研磨法形成稳定的油包水乳剂。乳化合格标准:滴入冷水后乳剂不分散。
初次免疫:
腹腔注射:给予百白破疫苗(大鼠0.5 ml,小鼠0.1 ml)以增强全身免疫反应。
皮内多点注射:在背部或腹股沟区注射抗原-CFA乳剂(大鼠1.0 ml,小鼠0.5 ml),分4-6点注射。
加强免疫:间隔30天后重复注射一次,可改用不弗氏佐剂(IFA)。
病理学检测:
肉眼观察:前列腺体积增大、质地变硬,表面呈灰黄色。
组织切片:HE染色显示间质淋巴细胞浸润、腺腔或扩张,电镜可见基膜破坏。
炎症因子检测:
通过qPCR或ELISA检测前列腺组织中 TNF-α、IL-1β、iNOS 等炎性因子显著升高。
行为学指标:
模型动物可能表现出排尿频率增加、疼痛等类临床症状。
优点:模拟了人类慢性前列腺炎的免疫病理特征,如炎症细胞浸润和自身免疫反应。
局限性:急性化学性炎症反应与临床差异较大,需结合长期观察。
应用方向:适用于 发病机制研究(如纤维化、疼痛机制)和 药物筛选(如抗炎中药方剂)。
无菌操作:避免手术感染干扰模型特异性。
剂量控制:高剂量抗原(15 mg/ml)可稳定诱导慢性炎症,低剂量可能反应不足。
伦理审查:需符合动物实验伦理规范,减少疼痛刺激。
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