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| 品牌 | 其他品牌 | 产地类别 | 国产 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
chip蛋白实验技术服务
作为自然科学的重要分支,生物整体科研涵盖基础生物研究与应用生物研究两大板块,核心使命是揭示生命本质、调控生命活动、改造自然,其研究成果广泛渗透到医学、农业、环保、能源等多个领域,尤其在医学领域,为疾病机制研究、新型诊疗技术研发、药物创新等提供了坚实的理论基础和技术支撑,是连接基础生物研究与临床医疗实践的关键桥梁。
1 、样品准备与交联
细胞收集后,用37%的formaldehyde处理细胞,交联核酸与DNA结合蛋白;
2. 超声打断染色质
裂解细胞,用Bioruptor将染色质超声破碎成200-1000bp片断;将片段分为两份,一份用于免疫共沉淀,一份用于对照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步骤所得一份片断与ChIP特异抗体结合进行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗体复合物。
4 、解交联及纯化 DNA
将富集的DNA/蛋白复合物解交联释放DNA的片段,并进行纯化(IP DNA);B步骤所得用于对照(Input DNA)的片断作不进行IP实验,但也要解交联并纯化。
5 、 DNA 段 PCR 扩增
针对ChIP DNA, Input DNA及对照DNA的目的片段设计特异性引物并进行荧光定量PCR扩增。
6 、结果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
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