大鼠ET-1检测实验服务

大鼠ET-1检测实验服务的原理：

用纯化的大鼠内皮素1(ET-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素1(ET-1)再与HRP标记的ET-1抗体结合，形成抗体抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠皮素1(ET-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素1(ET-1)浓度。

大鼠ET-1检测实验服务的样本处理要求：

 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转1分)。仔细收集上青，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右(2000-3000 转1分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000 转1分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集.上清。检测细胞内的成份时，用PBS (PH7.2-7.4) 稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000 转1分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本:切割标本后，称取重量。加入- -定量的PBS, PH7.4. 用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8"C的温度。加入一定量的PBS (PH7.4)， 用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于20C保存，但应避免反复冻融.
7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP) 活性。