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荧光素酶( Luciferase )是生物体内催化荧光素(luciferin )或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称。双荧光素酶报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶活性的一种报告系统,通常采用第二个报告基因(如海肾荧光素酶报告基因)来减少实验的变化因素。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素,在荧光素氧化的过程中,会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发 光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。
实验流程:
1.构建表达载体和荧光素酶报告基因表达载体。
2.细胞培养及质粒共转染。
3.荧光素酶活性检测。
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