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染色机制:油红O作为脂溶性染料,通过物理吸附作用与中性脂肪(甘油三酯、脂蛋白等)特异性结合,使脂滴呈现鲜红色
应用场景:用于脂肪变性、动脉粥样硬化斑块脂质沉积及脂肪源性肿瘤的鉴别诊断
样本制备
固定:新鲜脂肪组织需4%多聚甲醛固定24小时(避免冻结)
切片:冰冻切片厚度6-10 μm,直接贴片或10%福尔马林短暂固定
染色步骤
预处理:70%乙醇浸洗20-30秒(减少背景染色)
染色:油红O染液(50%乙醇配制)避光染色10-15分钟
分化:60%异丙醇分色至间质无色(镜下控制)
复染:苏木素染核1-2分钟,流水返蓝
封片观察
甘油明胶封片,避免气泡(切片微湿时操作)
显微镜下脂滴呈红色,细胞核蓝色
染色液饱和性:染液需现配现用,未饱和易致沉淀
分化控制:过度分化会导致脂滴着色变浅
特殊样本:
动脉粥样硬化组织需延长染色至20分钟
脂肪肝样本建议增加连续切片数量
正常脂肪细胞:胞内充满均匀红色脂滴
病理变化:
脂肪变性:肝细胞胞质内散在红色脂滴
脂肪栓塞:血管腔内可见红色脂滴团块
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