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染色机制:苏木精(碱性染料)与细胞核DNA结合显蓝紫色,伊红(酸性染料)与胞质蛋白结合显粉红色,形成核质对比
病理学意义:通过细胞形态异常(如核分裂增多、核质比失调)辅助鉴别肿瘤性质
样本前处理
固定:肿瘤组织需4%多聚甲醛固定≥48小时,避免自溶
脱水包埋:梯度乙醇脱水→二甲苯透明→石蜡浸渍(60℃)
切片制备
厚度5 μm,45℃水浴展片,60℃烤片1小时防脱片
染色步骤
脱蜡:二甲苯Ⅰ/Ⅱ各10分钟
复水:100%→75%乙醇梯度水化,蒸馏水冲洗
核染色:苏木精3分钟→1%盐酸酒精分化30秒→流水返蓝
质染色:伊红2分钟(腺癌等可延长至5分钟)
封片:中性树胶封固,避免气泡
正常组织:核蓝紫色规则,胞质粉红色均匀
肿瘤特征:
核异型性(大小不一、深染)
病理性核分裂象
间质浸润(胶原纤维排列紊乱)
质量控制:分化时间需精确控制,避免过染或欠染
特殊样本:
纤维瘤需缩短伊红染色时间(防过深)
转移癌建议增加连续切片数量
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