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样本准备
新鲜组织速冻：-25℃冷冻箱速冻3-5分钟，切8μm厚度切片
。
直接固定：切片经4%多聚甲醛或95%乙醇固定10分钟，蒸馏水冲洗
。
染色步骤
焦油紫/硫堇染色：浸入1%焦油紫或硫堇染液10分钟至1小时（根据组织类型调整）
。
分色：70%酒精分化数秒至数分钟，显微镜下控制至背景透明、Nissl小体清晰
。
脱水封片
梯度酒精脱水（70%→80%→95%→无水乙醇），二甲苯透明，中性树胶封固
。
染色控制：分色是核心步骤，需显微镜下实时观察避免过度脱色
。
结果判读：
阳性信号：Nissl小体呈深紫色（神经元胞质内颗粒状结构）。
背景：应为无色或浅灰色，否则需延长分色时间
。
优势：冰冻切片保留更多脂溶性成分，适合快速检测
。
局限性：组织形态略肿胀，需经验判读
。
如需长期保存，建议转换为石蜡切片（需避免解冻后固定）
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