软琼脂克隆形成实验服务

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简要描述：软琼脂克隆:克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。

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实验步骤

1.获取样本，培养细胞，

2.调整细胞悬液密度为1x103个/ml细胞。

3.制备底层琼脂,溶化的5%琼脂和 37℃ 左右预温的新鲜培养液以1:9比例在 40℃均匀混合，加入培养血(直径 60mm )中，每皿含0.5%琼脂培养基2ml，室温下琼脂凝固。

4.制备上层琼脂37℃密度每川含200个的细胞暴液15ml移入小烧杯中，加入 40℃，5%琼脂等体积混匀，即成025%半盾体琼脂培养其，配好的半固体琼脂培养其立即加入铺有底层琼脂的培养川中，室温下琼脂释固。 37℃、5%CO2静詈培养2-3周。

5.当培养川中出现肉眼可见克降时,终止培养,弃去培养液，PBS液小心浸洗2次，空气干燥，电酶固定15分钟，车用醇后空气干燥，用Giemsa染液染色10分钟，流水缓惕洗去染液，空气干燥。

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