全国服务咨询热线:

15221734409

Products产品中心

免疫荧光染色服务

简要描述:免疫荧光又称免疫荧光抗体。免疫荧光实验原理是将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少,相对使用标记抗体用量偏大。利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。上海伊莱博致力于临床前药效学CRO实验,有着多年的免疫荧光染色服务的经验。

  • 更新时间:2022-12-27
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:54

详细介绍

一、制片

选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片,洗净后浸泡于无水乙醇和乙.氧.基.乙.烷等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。

二、固定

除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,一般均应固定。

三、水洗

固定后以冷的0.01 Mol/L pH7.4PBS液浸泡冲洗,最后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光。

四、染色

染色分直接染色法与间接染色法。

1. 材料与试剂

(1)荧光抗体,稀释至应用浓度。

(2)0.01 Mol/LpH7.4PBS液

(3)9份优质甘油加1份pH7.4PBS液即为甘油缓冲液。甘油有减少非特异性荧光的作用。

(4)带盖方盘

2.直接染色法

(1)将固定好的玻片置于湿盘中,滴加荧光抗体染色液,以覆盖为度,加盖,37℃感做30min~45min,

(2)PBS冲洗3次,每次冲洗3 min,即3x3冲洗。

(3)蒸馏水冲洗。

(4)滴甘油缓冲液一滴,封片,荧光显微镜检查。

3. 间接染色法

(1)检查抗原:

①取固定标本,加已知的免疫血清,37℃孵育30 min。

②以PBS液3x3冲洗。

③再加荧光标记的抗抗体,37℃孵育30 min。

④PBS 3x3冲洗。

⑤H2O冲洗,凉干。

⑥加甘油缓冲液,封片、镜检。

(2)检查抗体:

①免疫后动物的淋巴组织涂片,自然干燥,甲醇固定。

②滴加相应抗原液(按1:100~1:500稀释),37℃孵育30 min。

③PBS液3x3冲洗。

④加荧光抗体,37℃孵育30 min。

⑤PBS液3x3冲洗。

⑥水洗,凉干。

⑦加甘油缓冲液,封片、镜检。


产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
伊莱博生物科技(上海)有限公司
地址:上海市宝山区长江南路180号B区650室
邮箱:yilaibo@shyilaibo.com
传真:021-36199917
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息