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免疫共沉淀实验服务

简要描述：免疫共沉淀实验服务:是一种利用抗原抗体相互作用的免疫学原理来研究蛋白质相互作用的经典实验方法，它可以确定两种蛋白在完整细胞内生理条件下是否存在相互作用。

  • 更新时间：2026-03-20
  • 厂商性质：代理商
  • 访  问  量：2049
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一、原理

用目标蛋白的抗体把蛋白从细胞裂解液里 “拉下来"，
如果另一个蛋白和它在体内结合，就会被一起沉淀下来，
最后用 Western blot 检测是否存在，证明两者相互作用。

二、核心用途

  • 证明两个蛋白直接 / 间接结合

  • 验证信号通路中蛋白复合物形成

  • 验证药物是否破坏蛋白相互作用

  • 检测转录因子与伴侣蛋白结合

三、标准实验流程（通用版）

  1. 细胞裂解
    用温和非变性裂解液（含蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂）
    冰上裂解 30 min，离心取上清
  2. 预清除
    加入 Protein A/G 磁珠 / 琼脂糖珠
    4℃轻摇 1 h，减少非特异性吸附
  3. 免疫沉淀（IP）
    加入目标蛋白一抗（或 IgG 阴性对照）
    4℃ 轻摇过夜孵育
  4. 结合磁珠
    加入 Protein A/G 磁珠
    4℃ 轻摇 2–4 h
  5. 洗涤
    洗涤液洗 3–4 次，去除杂蛋白
  6. 洗脱与 Western blot
    上样缓冲液煮沸洗脱
    跑胶 → 转膜 → 孵育另一个蛋白的抗体检测

四、结果怎么看

  • IgG 对照组无条带

  • IP 组出现目的条带 → 两蛋白存在相互作用

  • 给药后条带变浅 → 药物抑制结合


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