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免疫沉淀实验服务

简要描述:免疫沉淀实验服务是一种纯化目的蛋白质,及抗原或抗体定性检测的常用方法。其基本原理基于“抗原-抗体"免疫反应,在蛋白提取液中加入某抗原特异的抗体,形成“抗原-抗体"的免疫复合物后,再与和免疫球蛋白(抗体)有高亲和性的Protein A/G beads孵育,纯化免疫复合物。

  • 更新时间:2026-03-20
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:1919

详细介绍

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一、定义

Immunoprecipitation,IP
用特异性抗体将细胞内某个目标蛋白从总蛋白中 “抓取" 并富集出来,用于后续检测。
和 Co-IP 区别:
  • IP:富集单个目标蛋白

  • Co-IP:富集蛋白复合物,检测相互作用


二、主要用途

  • 富集低丰度蛋白,方便 Western blot 检测

  • 检测蛋白磷酸化、泛素化、乙酰化等修饰

  • 纯化蛋白用于质谱、酶活实验

  • 验证抗体特异性


三、实验流程(标准)

  1. 细胞裂解

    非变性 / 温和变性裂解液,加蛋白酶 / 磷酸酶抑制剂

  2. 预清除

    加 Protein A/G 磁珠,减少非特异结合

  3. 免疫沉淀

    目标蛋白一抗,4℃ 孵育过夜

  4. 结合磁珠

    加 Protein A/G 磁珠,4℃ 结合 2–4 h

  5. 洗涤

    洗 3–4 次,去除杂蛋白

  6. 洗脱

    上样缓冲液煮沸,做 Western blot 或质谱


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