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平板克隆形成买验基本步骤:
1.取对数生长期的各组细胞,分别用0.25%****消化并吹打成单个细胞并把细胞县浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中衡用。
2.将细胞县液作梯度倍数稀释,每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种合10mL 37"C预温培养液的咖中,并轻轻转动,使细胞分散均匀。置37C、5%CO,及饱和温度的细胞培养箱中培养2-3周。
3.经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克降时,终止培养。弃去上清液,用PBS小心浸洗2次。加甲醛固定细胞5ml固定15分钟。然后安固定液加适量GIMSA应用染色液染10-30分钟然后用流水缓慢洗去染色源,空气干燥。
4.将平皿倒置并叠加一张带网格的适明胶片,用肉眼直接计数克降或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数,再计算克隆形成率,克隆形成率=克隆数/接种细胞数。
我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员(博士后)2人,助理研究员(博士)4人,核心研究员(硕士)15人,主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、较好的的服务平台,为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前,及,涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。
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