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软琼脂克隆形成服务实验步骤
1.获取样本,培养细胞,
2.调整细胞悬液密度为1x103个/ml细胞。
3.制备底层琼脂,溶化的5%琼脂和 37℃ 左右预温的新鲜培养液以1:9比例在 40℃ 均匀混合,加入培养皿(直
径 60mm)中,每皿含0.5%琼脂培养基2ml,室温下琼脂凝固。
4.制备上层琼脂 37℃ 密度每川含200个的细胞悬液1.5ml移入小烧杯中,加入 40℃、5%琼脂等体积混匀,即成0.25%半固体琼脂培养基。配好的半固体琼脂培养其立即加入铺有底层琼脂的培养用中,率温下琼脂凝固。37℃,5%CO2静罟培养2-3周。
5.当培养血中出现肉眼可见克降时,终止培养,弃去培养液,PBS液小心浸洗2次,空气干燥,甲醇固定15分钟,弃甲醇空气干燥,用Giemsa染液染色10分钟,流水缓愠洗去边液,空气干燥。
软琼脂克隆形成服务:伊莱博生物拥有专业的技术支持和实验操作人员团队,核心成员来自中科院、复旦、交大、同济等国内重点高校及科研机构,能够提供前沿的、完善的实验技术咨询与服务。为了响应国家大力发展基础研究的号召,推动实验科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,为广大科研工作者提供实验技术培训服务,从理论和实操两个部分,培养其科研思维以及解决问题的能力,为今后的科研工作奠定坚实的基础。
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