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帕金森病动物模型

简要描述:帕金森病动物模型:帕金森氏病(Parkinson’s Disease,PD)是一种会影响运动的进行性神经系统疾病,老年人多见,平均发病年龄在60岁左右,症状会逐渐出现,有时始于不易察觉的单手震颤,还常导致僵硬或运动缓慢。除此之外帕金森患者也表现出了感觉障碍和认知功能障碍等非运动症状。

  • 更新时间:2024-01-08
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帕金森病动物模型

自发现以来,6-OHDA一直在帕金森病的临床前研究中扮演着重要角色。由Ungerstedt和Arbuthnott在1970年共同创立的单侧注射旋转模型成为了在模式动物上被最为广泛使用的帕金森模型之一。

6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)是多巴胺的羟基化衍生物,因其化学结构与DA类似,因此能够同DA竞争摄取位点,进而被摄入胞内。进入胞内后,6-OHDA能够被氧化分解,产生活性氧,通过MAO(单胺氧化酶)进一步产生氧自由基,或直接引起线粒体功能障碍,导致DA能神经元死亡。

因其造成动物的生物化学和神经化学损伤类似于PD,故常被用于诱导动物PD模型。

由于6-OHDA不能穿透血脑屏障,因此为了达到中枢神经系统毁伤的效果,在使用6-OHDA进行帕金森造模时,需要直接注射入动物脑内,才能损伤中枢神经元。

通过使用脑li体定wei注射技术将6-OHDA注射到前脑内侧束(其向前脑传递多巴胺能和5-羟色胺能投射)或纹状体靶向黑质纹状体多巴胺能途径来获得帕金森模型大鼠。【具体的注射位点可以是黑质致密部(substantia nigra pars compacta, SNpc)、纹状体(striatum)或者位于二者之间的前脑内侧束(MFB)。】

可以进行单侧造模与双侧造模,其中单侧造模可以提高动物耐受力,并可以将正常侧作为内部控制组与造模侧进行对照研究,以便于更好地区分正常与异常运动区并评估损伤引起的运动缺陷。


帕金森病动物模型造模方法:


①SD大鼠适应一周后,腹腔麻醉,将麻醉后大鼠固定于脑li体定向仪上。

②剪开头皮后用棉签轻轻擦拭颅骨表面,将前囟(bregma)和后囟(lambda)点暴露出来。

③调节立li定wei仪,将前囟和后囟点的高度调节到一致。以前囟(Bregma)点为原点,找到注射位点所在的坐标

④用颅骨zuan沿注射坐标位点钻孔,以保证微量注射器进针时不碰到孔壁。使用微量注射器吸取6-OHDA(注意避光),缓慢插入注射位点,以0.5ul/min的速度将6-OHDA注射到目标脑区,注射剂量为4μl。



帕金森病动物模型验证

由于动物行为特异性差异,判断大鼠帕金森病模型是否成功,通常以动物出现旋转行为的次数为标准,一般超过7转/min即为成功的帕金森病模型,否则为不成功模型。

这类模型优点是注射靶位选取灵活,注射剂量可调,动物行为变化稳定可靠,检测量化性好,多用于PD的临床前药物研究和药理疗效判定、神经保护、细胞移植和基因治疗等方面的研究。

缺点是①神经元的毁损出现的较早,这与临床PD病人的中脑黑质多巴胺能神经元的渐进性死亡不同;②近距离的毁损很难把握毁损的程度,这使得采用这种方法获取部分损毁的模型的成功率很低;③小鼠在异常不自主运动严重程度方面表现出较大的变异性,这会加大实验数据的不稳定性。






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