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前列腺增生动物模型动物的选择
目前应用于BPH动物模型复制的动物有大、小鼠,猩猩,犬,猕猴,棕色挪威鼠等。其中Wistar大鼠、SD大鼠和犬是较为理想的。
灵长类动物与人类的前列腺解剖结构极为相似,是好选择,但因其品种极稀有,同时涉及伦理、造模时间较长、价格昂贵等原因,使灵长类作为实验动物受到限制。
老年犬存在自发性前列腺增生现象,自发性和激素诱导的犬BPH模型均可用于BPH药物评价。自发性前列腺增生的老年犬价格高、难大规模获得,应用受限,而睾酮诱导的犬BPH模型相对容易获得。
小鼠、大鼠具有种纯、量大、价廉等优点,常被作为建立BPH模型的实验动物。鼠类的前列腺背外侧叶组织学上与人类类似,幼龄小鼠前列腺对外源性雄激素最为敏感,并且死亡率低,但与BPH年龄依赖存在不一致。目前研究显示外源性雄激素干预正常或去势雄性大鼠,其中Wistar和SD是最易建立BPH模型的品系。
前列腺增生动物模型造模方法
目前BPH模型成功判断标准主要有以下几个方面:表观指标,如前列腺脏器指数、垫料潮湿度、活动次数及尿流动力学指标,如膀胱内压及排尿间隔是模型制作成功的核心指标。
组织病理学指标,如上皮细胞及间质组织的增生是前列腺增生病理变化的直接依据,亦是判定该模型是否成功的决定因素。生化指标如雌雄激素、肽类生长因子、增殖与凋亡蛋白,可以反映前列腺增生的发生发展程度。作为与临床诊断符合程度判定的客观指标,上述评价指标从不同层面反映BPH情况。
一睾酮诱导
该方法主要适用于大鼠、小鼠,大鼠报道较多。主要分为去势和非去势两种。
非去势法(小鼠) 造模方法:
选取雄性ICR小鼠,体质量18~22g,采用腹腔注射的方式,按剂量5mg/kg连续给予丙suan睾酮31d。
非去势法(大鼠) 造模方法:
选取雄性SD大鼠,体质量250~270g,每隔 1d对大鼠进行皮下注射丙suan睾酮(50mg/kg) ,丙suan睾酮可溶于橄榄油,给药质量浓度为 0.001mL/g,皮下注射连续4周。
去势法(大鼠) 造模方法:
选取体质量280~320g的Wistar雄性大鼠,腹腔麻醉,经阴囊摘除双侧睾丸,此操作要在无菌环境下进行。手术后为防止大鼠感染,可对大鼠连续3d肌内注射青霉su(2.5×105U/kg) 。手术后,大鼠进行恢复7d,于第8天选取已去势且状态恢复较好的模型大鼠,每天按剂量4mg/kg皮下注射造模药物丙suan睾酮(可将丙suan睾酮溶于植物油中,如大豆油等) ,持续30d制备大鼠前列腺增生模型。
去势法(小鼠) 造模方法:
选取KM雄性小鼠,体质量20~23g,腹腔麻醉,麻醉后经阴囊摘除双侧睾丸,此操作在无菌环境下进行; 为防止感染,对手术后的小鼠进行肌内注射青霉su(2.5×105U/kg) ,注射连续3d。注射3d青霉su后,可取去势成功、状态良好的小鼠,每日按剂量5mg/kg皮下注射丙suan睾酮(可溶于大豆油中) ,连续3周,制备小鼠前列腺增生模型。
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