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RT-PCR

简要描述:RTPCR,反转录·聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是将RNA的反转录(reverse transcription )和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。

  • 更新时间:2024-03-14
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详细介绍

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首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR%E6%8A%80%E6%9C%AF/176650?fromModule=lemma_inlink">RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆 特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA体外转录RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。

提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。


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