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细胞染色实验服务

简要描述:细胞染色实验服务是伊莱博生物的基础服务项目之一,由细胞平台经验丰富的实验人员操作完成。

  • 更新时间:2025-05-21
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:4497

详细介绍

品牌其他品牌应用领域医疗卫生,生物产业

一、基础染色技术

1. HE染色(苏木精-伊红染色)

  • 原理‌:苏木精(碱性染料)与带负电荷的DNA结合染蓝紫色细胞核;伊红(酸性染料)与带正电荷的蛋白质结合染粉红色细胞质

  • 流程‌:

    1. 样品制备:细胞接种于含盖玻片的培养瓶,CO₂培养箱培养至单层

    2. 固定:95%乙醇固定15分钟,PBS洗涤

    3. 核染色:苏木精染5-10分钟→盐酸乙醇分色→氨水蓝化

    4. 质染色:伊红染5-10分钟

    5. 脱水透明:梯度乙醇脱水,二甲苯透明

    6. 封片观察:中性树胶封固,光镜观察

2. 荧光染色技术

  • 鬼笔环肽染色‌:标记微丝结构,FITC标记后与DAPI核染色配合使用

  • 线粒体染色‌:使用MitoTracker系列染料,利用线粒体膜电位特性特异性标记

二、实验操作要点

1. 通用流程

  1. 细胞准备‌:以2-10×10³ cell/coverslip密度接种,培养48小时

  2. 固定‌:3.7-4%甲醛/PBS室温固定10分钟

  3. 穿膜‌:0.1% Triton X-100 + 0.1M Glycine冰上处理30分钟

  4. 封闭‌:5mg/ml BSA室温封闭1小时

  5. 染色‌:根据目标结构选择特异性染料

2. 活死细胞染色

  • 使用Calcein AM(标记活细胞)和PI(标记死细胞)双染

  • 共聚焦显微镜观察

三、前沿技术发展

最新研究开发了"数字孪生"技术,通过AI驱动的3DCellScope系统实现类器官高速3D分析,突破传统染色方法的局限
。该方法能:

  • 多级分割(细胞核/细胞/类器官)

  • 量化3D形态学和拓扑学特征

  • 无需复杂染色即可分析微重力等条件下的细胞响应

四、注意事项

  • 染料工作浓度需精确配置

  • 不同结构需要匹配特定染料(如DAPI染核,MitoTracker染线粒体)

  • 染色时间影响结果质量,通常30-60分钟

  • 保持pH稳定(如HE染色需pH6.7-6.8)


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