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WGA荧光染色技术服务

简要描述:麦胚凝集素(WGA)是从谷物中提取出来,可以特异性的结合心肌细胞膜上的一种糖蛋白,二者结合起来可以将心肌细胞膜染出来。WGA可以把心肌细胞膜染出来,这样是否肥大的细胞从图像与正常组的对比就可以看出,也可以用专门的软件对染出的细胞进行直径、面积等的测量,能够分析心肌细胞是否肥大。

  • 更新时间:2026-03-20
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:2471

详细介绍

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一、原理

  • WGA 是植物凝集素,特异性结合细胞膜糖蛋白 / 糖脂上的 N - 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与唾液酸残基

  • 荧光标记 WGA(如Alexa Fluor 488/555/647、FITC、Cy5.5)结合后,在对应激发光下发出荧光,清晰勾勒细胞膜轮廓

  • 关键:不做透化→仅染细胞膜;做透化→可染高尔基体、糖基化蛋白

二、标准染色结果

  • 细胞膜 / 糖萼 / 基底膜 / 几丁质:荧光色(依标记染料)

    • FITC/Alexa 488:绿色(Ex 488 nm / Em 519 nm)

    • Alexa 555/Cy3:红色(Ex 555 nm / Em 565 nm)

    • Alexa 647/Cy5.5:远红 / 近红外(Ex 647 nm / Em 668 nm)

  • 细胞核:蓝色(DAPI 复染,Ex 358 nm / Em 461 nm)

  • 背景:极低荧光

三、适用样本

  • 活细胞、固定细胞爬片

  • 石蜡 / 冰冻组织切片(肝、肾、肺、心肌、皮肤、神经)

  • 类器官、3D 培养

  • 真菌(几丁质)、革兰氏阳性菌、酵母

四、核心用途

  1. 细胞膜轮廓标记:细胞形态、肥大 / wei缩、迁移、共定位

  2. 基底膜 / 糖萼:肾、肺、血管、肿瘤间质糖基化

  3. 纤维化:与天狼猩红 / Masson 共染,定位胶原与膜结构

  4. 微生物:真菌细胞壁、细菌膜、酵母出芽疤痕

  5. 神经科学:顺行 / 逆行示踪、突触标记

五、通用步骤(细胞 + 组织)

1. 样本前处理

  • 活细胞:PBS 洗 2 次,直接染色(不固定、不透化)

  • 固定细胞:4% 多聚甲醛固定 15–20 min,PBS 洗,不透化

  • 石蜡切片:脱蜡→梯度酒精→水→抗原修复(EDTA pH8.0,可选)→PBS 洗

2. 染色(避光)

  • 工作浓度:5–10 μg/mL(荧光 WGA 溶于 PBS)

  • 孵育:室温 / 37℃ 10–30 min(活细胞≤20 min,防毒性)

3. 洗涤与复染

  • PBS 洗 3×5 min,去未结合 WGA

  • DAPI(1 μg/mL)复染核:室温避光 5–10 min,PBS 洗

4. 封片与观察

  • 抗荧光淬灭封片剂封片

  • 荧光 / 共聚焦显微镜,按染料选激发 / 发射通道


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