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动物大鼠面神经核取材部位
大鼠面神经核位于延髓腹外侧部,呈吻尾稍长,背腹扁的椭圆体。大鼠面神经核吻尾长约1.6mm,平均体积约1.293mm3。大鼠面神经核内的细胞常聚集成几个亚群,各细胞亚群与外周面神经分支分布的关系已有研究。然而,由于面神经核小,其取材是个难题,今天我们来介绍大鼠面神经核取材的简易方法。
动物大鼠面神经核取材操作
1. 大鼠麻醉,固定到脑立体定位仪上。
2. 确定Bregma点。
3. 参考《大鼠脑立体定位图谱》,确定面神经核的位置。
4. 在Bregma-9.80mm的位置左右转两孔,然后在Bregma-12.30mm的位置左右转两孔。
5. 从立体定位仪上移下大鼠,心脏灌流,灌注完毕后,剥除颅骨,记下小脑上4个打孔位置,取出整体的大脑、小脑及脑干。
6. 依据小脑上4个孔的位置,用手shu刀片平行切两刀,如上图,然后用4%的多聚甲醛后固定,冰冻切片,片厚10um。
7. 将切好的标本,光学显微镜下观察,确认是面神经核后,HE染色,拍照。
8. 大鼠面神经核大量取材,取下整体的大脑、小脑及脑干后,依据上述经验,直接取材即可。
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