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雨蛙素诱导小鼠慢性胰腺炎动物模型
雨蛙素诱导小鼠慢性胰腺炎动物模型:
品系与性别:C57BL/6雄性小鼠(8-10周龄,体重20-25g),部分研究使用PRSS1转基因小鼠增强人类慢性胰腺炎(CP)相似性
。
饲养条件:SPF级环境,实验前禁食12小时(自由饮水)
。
母液配制
溶解1 mg雨蛙素于1 mL生理盐水,配成1 mg/mL母液,过滤除菌后分装冻存
。
工作液浓度
使用前稀释至5-10 μg/mL(生理盐水),常用注射剂量50 μg/kg。
给药方案
基础方案:每周3次腹腔注射(50 μg/kg),持续6-7周
。
强化方案:联合LPS(10-15 mg/kg)加重纤维化,末次雨蛙素注射后追加LPS
。
急性转慢性:通过多次急性诱导(如每周多次雨蛙素注射)模拟慢性病程
。
病理学观察
HE染色:腺泡细胞变小、炎性细胞浸润、间质纤维化。
胶原沉积:ku味酸-天狼星红染色定量纤维化程度
。
免疫组化:检测α-SMA表达,反映胰腺星状细胞活化
。
生化指标
血清定粉酶、脂肪酶水平
。
炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)检测
。
分子机制分析
Western blot检测NF-κB/p65、IL-6等通路蛋白
。
qPCR分析纤维化相关基因(如Smad3)
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